Bộ keonhacai com hôm nay cụ elisa của con người 2

Giới thiệu
Aquaporin 2 (AQP2) là một protein màng tương đối nhỏ bao gồm khoảng 300 axit amin và có liên quan đến nồng độ nước tiểu trong ống thu của thận và là một kênh nước chỉ cho phép các phân tử nước đi qua, và chịu trách nhiệm điều khiển lượng nước trong cơ thể Khi cơ thể bị mất nước, vasopressin kích thích AQP2 di chuyển từ bên trong các tế bào sang bề mặt tế bào, chỉ tái hấp thu nước từ nước tiểu ban đầu và cô đặc nước tiểu Được biết, nếu bất thường di truyền AQP2 xảy ra, bệnh tiểu đường thận có thể dẫn đến mất nước nặng
Các tính năng bộ
- 25332_25382
- aquaporin 2 (AQP2) trong nước tiểu có thể được đo lường cụ thể và chính xác
- *Bộ này là thuốc thử nghiên cứu và không thể được sử keonhacai com hôm nay để chẩn đoán hoặc hỗ trợ bệnh tật
Cấu hình bộ


- 1Thiết bị, thiết bị cần thiết, vv
- 1xi lanh nhanh
- 2pipet có kích thước
- 3Micropipettes và Mẹo
- 4Shaker tấm
- 5Máy giặt tấm
- 6ươm tạo
- 7khăn giấy
- 8đầu đọc tấm (bước sóng đo: 450nm)
- 9Ống micromet, vv
- 2Phương pháp chuẩn bị và lưu trữ thuốc thử
- 1Giải pháp làm sạch
Chuẩn bị được thực hiện bằng cách trộn nước tinh khiết theo tỷ lệ 960 mL với tổng lượng dung dịch rửa rửa (40 ml) Nếu các tinh thể kết tủa trong dung dịch gốc, làm nóng nó và chuẩn bị nó sau khi hòa tan - 2Giải pháp tiêu chuẩn
20 μl dung dịch tiêu chuẩn (600 ng/mL) được pha loãng 20 lần với 380 μl dung dịch đệm phản ứng chính để tạo thành dung dịch tiêu chuẩn 30,0 ng/ml Chuẩn bị các dung dịch tiêu chuẩn ở nồng độ 15,0ng/mL, 7,50ng/mL, 3,75ng/mL, 188ng/mL, 0,94ng/mL và 0,47ng/mL bằng cách pha loãng dung dịch tiêu chuẩn 30,0ng/mL Giải pháp chuẩn 0ng/ml là bộ đệm phản ứng chính Bảng 1 cho thấy phương pháp pha loãng cho giải pháp tiêu chuẩnBảng 1: Cách pha loãng dung dịch tiêu chuẩn - 328447_28473
Trộn dung dịch chứng khoán kháng huyết thanh Aquaporin 2 Anti-Human trong 12 ml dung dịch đệm phản ứng thứ cấp và bậc ba theo tỷ lệ 60 μL để chuẩn bị số lượng cần thiết Chuẩn bị ngay trước phản ứng thứ hai - 4
hỗn hợp dung dịch gốc IgG có nhãn enzyme được dán nhãn enzyme trong 12 ml bộ đệm phản ứng thứ cấp và cấp ba theo tỷ lệ 60 μL để chuẩn bị số lượng cần thiết Chuẩn bị ngay trước phản ứng thứ ba - 5Giải pháp chất nền
Trộn dung dịch chất nền B trong 6 ml dung dịch chất nền A để chuẩn bị số lượng cần thiết Chuẩn bị ngay trước khi phản ứng phát triển màu sắc và sử keonhacai com hôm nay kịp thời
- *Mẫu nước tiểu để đo phải được xử lý trước Để biết hướng dẫn tiền xử lý, vui lòng tham khảo hướng dẫn sử keonhacai com hôm nay
- 1Giải pháp làm sạch
- 3Phương pháp đo lường
1 Kiểm tra độ nhạy
Độ hấp thụ của dung dịch tiêu chuẩn ở mức 0ng/ml dưới 0,100
Độ hấp thụ của dung dịch tiêu chuẩn là 0,47ng/ml trừ đi độ hấp thụ của 0ng/ml cho thấy 0,030 trở lên
Độ hấp thụ của dung dịch tiêu chuẩn 300ng/ml trừ đi độ hấp thụ của 0ng/ml cho thấy 1000 trở lên
2 Kiểm tra độ chính xác
Các phép đo cho ba loại mẫu vật được kiểm soát biểu thị các giá trị trong phạm vi ± 30% của nồng độ đã biết
3 Kiểm tra khả năng tái tạo đồng thời
Khi ba loại mẫu được kiểm soát được đo bốn lần cùng một lúc với các phép đo kép, hệ số biến đổi của các giá trị đo được là dưới 20%
4 Phạm vi đo lường
Kết quả của việc thử nghiệm bằng cách sử keonhacai com hôm nay mẫu nước tiểu được xử lý trước làm mẫu đo tại cơ sở của chúng ta, phạm vi đo cho aquaporin 2 của con người được đặt thành 0,27-300 ng/ml (phạm vi đo cho mẫu nước tiểu trước khi điều trị trước
Bộ này có giá trị trong 18 tháng kể từ ngày sản xuất Ngày hết hạn được hiển thị trên hộp bên ngoài của bộ Hãy chắc chắn lưu trữ ở 2-8 ° C Ngoài ra, lưu trữ các sản phẩm tiêu chuẩn trong bao bì riêng ở -20 ° C trở xuống
có thể được sử keonhacai com hôm nay trong bốn phần Lưu trữ thuốc thử thành phần còn lại ở trạng thái niêm phong ở 2-8 ° C Lưu trữ các sản phẩm tiêu chuẩn trong bao bì riêng biệt ở -20 ° C trở xuống (Nếu sử keonhacai com hôm nay riêng biệt, hãy cắt bỏ con dấu tấm cần thiết và sử keonhacai com hôm nay nó)
Không sử keonhacai com hôm nay kết hợp các thuốc thử cấu hình bộ với các số sê -ri khác nhau Ngay cả khi số sê -ri là giống nhau, không sử keonhacai com hôm nay kết hợp các thuốc thử và các kháng thể đóng gói khác nhau
Đảm bảo trả lại mỗi thuốc thử cấu thành cho 20-30 ° C trước khi sử keonhacai com hôm nay
Nồng độ của bốn loại mẫu được kiểm soát đã được tính toán từ đường cong tiêu chuẩn của sản phẩm tiêu chuẩn đã bị đóng băng đến 7 lần, và kết quả là, không có tác keonhacai com hôm nay đối với các phép đo lên tới 7 lần để làm tan sản sản phẩm tiêu chuẩn
Ảnh hưởng của độ trễ thời gian xảy ra khi chèn mẫu đo vào giếng của tấm đã được xác nhận Khi thời gian cần thiết để lấy mẫu trên cùng một tấm là 0, 15 và 30 phút, không có ảnh hưởng đến các phép đo
Không có máy giặt tấm và không có phép đo nào bị ảnh hưởng nếu tất cả các hoạt động rửa được thực hiện thủ công
- [Quy trình làm sạch]
- 1Sau khi khử chất lỏng trong đĩa, nó nhanh chóng được đập vào khăn giấy để hấp thụ hoàn toàn và loại bỏ chất lỏng còn lại
- 2Đặt 300 μl dung dịch rửa vào mỗi giếng
- 3Decant và loại bỏ
- 4Lặp lại (2) đến (3) hai lần nữa
- 5Sau khi khử chất lỏng trong đĩa, nó nhanh chóng được đập vào khăn giấy để hấp thụ hoàn toàn và loại bỏ chất lỏng còn lại
Quy trình lấy mẫu tiêu chuẩn là thêm 100 μl bộ đệm phản ứng chính vào mỗi giếng, sau đó 50 μl dung dịch chuẩn và mẫu vật ở mỗi nồng độ cho mỗi giếng Bằng cách thực hiện sai quy trình, trước tiên chúng tôi đã thêm 50 μL dung dịch tiêu chuẩn và mẫu của mỗi nồng độ vào mỗi giếng, sau đó thêm 100 μL bộ đệm phản ứng chính vào mỗi giếng, sau đó xác nhận ảnh hưởng của quy trình và không có tác keonhacai com hôm nay đối với phép đo
Chúng tôi đã nghiên cứu ảnh hưởng của tốc độ lắc (máy lắc Labinco LD-45) bằng cách sử keonhacai com hôm nay ba loại mẫu được quản lý và kết quả là, sự dao động trong độ hấp thụ đã được xác nhận theo cách phụ thuộc vào tốc độ quay Tuy nhiên, như thể hiện trong sơ đồ dưới đây, có thể thu được giá trị đo gần như tương tự trong khoảng từ 400 đến 800 vòng / phút, do đó, tốc độ lắc có thể được đo ở 400 đến 800 vòng / phút Tuy nhiên, các mô hình khác có thể có tốc độ xoay khác nhau

Delfia Tấm Shaker: 1296-004 (Tên nhà sản xuất: Perkinelmer)
Nó đã được xác nhận rằng 600 vòng / phút và thấp (khoảng 920 vòng / phút) có thể tạo ra các phép đo tương tự như máy lắc của Labinco 600 vòng / phút
Máy lắc máy trộn micro: Khi sử keonhacai com hôm nay MX-4 (Tên nhà sản xuất: Sanko Junyaku),
Nó đã được xác nhận rằng thang đo vòng quay 670 vòng / phút và 2,5 vòng / phút (khoảng 990 vòng / phút) mang lại các phép đo gần như giống như máy lắc của Labinco 600 vòng / phút
Ảnh hưởng của nhiệt độ phản ứng đã được kiểm tra bằng cách sử keonhacai com hôm nay ba loại mẫu được kiểm soát và biến động phụ thuộc nhiệt độ phản ứng trong độ hấp thụ đã được xác nhận Tuy nhiên, giá trị đo có thể thu được ở xấp xỉ giữa 20 ° C và 30 ° C, vì vậy hãy chắc chắn phản ứng ở 20 ° C đến 30 ° C
Chúng tôi đã nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian phản ứng bằng cách sử keonhacai com hôm nay ba loại mẫu được kiểm soát và gần như cùng một phép đo thu được trong khoảng từ 110 đến 130 phút
Phản ứng của Carteral có thể qua đêm Khi qua đêm, để nó ở 4 ° C trong 17 giờ
Chúng tôi đã nghiên cứu ảnh hưởng của hệ số pha loãng của dung dịch gốc kháng huyết thanh chống người Aquaporin 2 và dung dịch IgG chống chuột được dán nhãn enzyme bằng cách xác nhận của các loại thuốc quản lý, và mặc dù có sự biến đổi của yếu tố pha loãng
Tính toán mỗi độ hấp thụ thực bằng cách trừ độ hấp thụ trung bình (giá trị trống) của 0ng/ml dung dịch tiêu chuẩn từ độ hấp thụ của dung dịch tiêu chuẩn và mẫu vật ở mỗi nồng độ Vẽ nồng độ của dung dịch tiêu chuẩn trên trục X và độ hấp thụ đáng kể của nó trên trục y Đổ đầy một đường cong hồi quy thích hợp cho mỗi ô (ví dụ: đường cong hồi quy logistic bốn tham số, vv) và tạo một đường cong hiệu chuẩn
Có thể đo aquaporin của con người 2 ở mức 0,27 đến 30,00ng/ml (phạm vi đo cho mẫu nước tiểu trước khi tiền xử lý là 0,35 đến 390ng/mL, gấp 1,3 lần so với điều chỉnh âm lượng) Kết quả thử nghiệm sử keonhacai com hôm nay mẫu nước tiểu được xử lý trước làm mẫu đo tại cơ sở của chúng ta cho thấy giới hạn phát hiện là 0,17ng/mL và giới hạn định lượng là 0,27ng/mL
Khi ba loại mẫu được kiểm soát (H, M, L) được đo bốn lần cùng một lúc, thử nghiệm tái sản xuất ngày đo được tiến hành và thử nghiệm tái sản xuất giữa các biện pháp được thực hiện bằng ba đối tượng đo khác nhau



Các mẫu được đo trong đó ba loại mẫu quản lý (H, M, L) và lượng dung dịch tiêu chuẩn bằng nhau ở mỗi nồng độ được trộn lẫn Các phép đo của aquaporin 2 của con người đã được xác định và tỷ lệ phục hồi được đánh giá dựa trên các giá trị lý thuyết Do đó, kết quả tốt đã thu được trong phạm vi ± 25% giá trị lý thuyết như hình dưới đây



Antiserum chống người được điều chỉnh pha loãng được chia thành hai phần, một phần được làm lạnh và phần còn lại được lưu trữ ở 25 ° C, và phép đo được thực hiện sau 4 giờ và không có ảnh hưởng nào đến phép đo
Giải pháp IgG chống rabbit được điều chỉnh pha loãng được chia thành hai phần, một phần được làm lạnh và phần kia được lưu trữ ở 25 ° C và phép đo được thực hiện sau 6 giờ và không có ảnh hưởng nào đến phép đo
dung dịch chất nền được chuẩn bị được chia thành hai phần, một phần được làm lạnh và phần còn lại được lưu trữ ở 25 ° C, và phép đo được thực hiện sau 3 giờ và không có ảnh hưởng đến phép đo
Độ hấp thụ được đo ngay lập tức, 30 phút, 1 giờ và 2 giờ sau khi thêm dung dịch dừng phản ứng và không có ảnh hưởng đến phép đo
Mẫu vật có thể đo được là nước tiểu của con người Mẫu nước tiểu nên được sử keonhacai com hôm nay để đo sau khi tiền xử lý Không loại bỏ trầm tích nước tiểu tại thời điểm này Khi AQP2 có mặt trong quá trình giải quyết, khuấy đều và nhanh chóng thu thập trầm tích
Khi vận chuyển mẫu nước tiểu, làm lạnh chúng Khi làm lạnh hoặc được bảo quản ở -20 ° C hoặc dưới, năm mẫu nước tiểu không có tác keonhacai com hôm nay đối với các phép đo lên đến chín tháng
Khi ba loại mẫu nước tiểu bị đóng băng và tan băng lên đến năm lần và được xử lý trước, không có ảnh hưởng nào đến các phép đo
Tiền xử lý luôn được yêu cầu để đo mẫu nước tiểu
Sau khi kiểm tra thời gian tĩnh của tiền xử lý, không có ảnh hưởng nào đến các phép đo trong vòng 10 đến 30 phút Thời gian tĩnh cho tiền xử lý có thể được đo trong 10 đến 30 phút
Không lấy mẫu kết tủa trong các mẫu nước tiểu được xử lý trước
Nếu mẫu nước tiểu được xử lý trước được lưu trữ ở 30 ° C bằng cách sử keonhacai com hôm nay ba loại mẫu nước tiểu được xử lý trước, không có ảnh hưởng đến các phép đo cho đến 24 giờ và khi làm lạnh, cho đến 7 ngày Hai loại mẫu nước tiểu được xử lý trước không ảnh hưởng đến các phép đo khi được lưu trữ trong tủ lạnh hoặc dưới -20 ° C
Chúng tôi đã nghiên cứu tính ổn định của ba loại mẫu được quản lý, mẫu nước tiểu được xử lý trước và thấy rằng các phép đo giảm khi được lưu trữ ở 30 ° C cho lạnh và được lưu trữ ở 30 ° C sau ngày thứ 7 Do đó, trong bất kỳ mẫu vật nào, tránh lưu trữ ở nhiệt độ phòng trong hơn một ngày và lưu trữ ở 8 ° C trở xuống

Gạch chân: Hậu chuẩn
Khi đóng băng lên đến năm lần bằng cách sử keonhacai com hôm nay ba loại mẫu nước tiểu được xử lý trước, không có ảnh hưởng đến các phép đo
